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水平電泳槽的使用步驟及使用注意事項

更新時間:2022-08-29      點擊次數(shù):1811
   水平電泳槽是用來對少量核酸樣品進行快速瓊脂糖電泳的裝置,制膠可在多用制膠器的膠槽中完成(無需膠布封口)。配備的多用途制膠器可以灌制60×60㎜的小膠、120×60mm的寬膠,還可以灌制60×120㎜的長膠,以及120×120㎜的大方膠。本電泳槽還配有8種不同齒數(shù)和厚度的梳子供選擇,樣品能量:2、3、6、8、11、13、18、25齒,標準梳和各種制備梳。灌制好的各種大小的瓊脂糖凝膠均可以放入水平電泳槽的平臺上進行電泳,做到槽多用,可節(jié)省實驗空間和實驗經(jīng)費。
 
  水平電泳槽的使用步驟及使用注意事項:
  一、電泳槽制膠步驟
  1、將瓊脂糖放在濾水浴或電磁攪拌器、微波爐中加熱至*溶化,然后冷卻至55℃左右,加入適當濃度的EB染料。
  2、將凝膠托盤放入配套的制膠盒中,或選用膠布封住托盤兩端,倒入冷卻后的瓊脂糖溶液。
  3、制膠前可根據(jù)所需凝膠的大小插入隔板,制膠前先用少許膠把隔板與托盤底部的縫隙封住,待凝固后再倒入凝膠。
  4、根據(jù)需要插入加樣梳,在室溫下待瓊脂糖自然凝固。
 
  二、電泳槽電泳步驟
  1、瓊脂糖凝固后,輕輕拔出加樣梳,并將托盤從制膠盒,制膠器中取出或撕下膠布,移入電泳槽。
  2、凝膠梳井端應(yīng)在負極,在電泳槽中注入緩沖液,使緩沖液液面沒過凝膠即可。
  3、用微量取樣器在梳井中加樣,依據(jù)極性蓋緊上蓋,連接電泳儀,選擇合適的電泳條件,開始電泳。
 
  水平電泳槽的使用主要事項:
  1.不允許將EB染色液加入電泳槽中,必須在電泳結(jié)束后且在染色區(qū)內(nèi)進行染色。
  2.正負級分不清楚,造成樣品跑入緩沖液。黑色為負極,紅色為正極,樣品由負極往正極跑,需在靠近負極一端加樣。
  3.加樣的時候,不能將槍頭插得太深,避免膠塊被穿透。
  4.必須按照要求的濃度對膠的濃度進行制備,不然,小分子物質(zhì)會從膠塊中跑出。
  5.若沒有經(jīng)驗,Z好定時,不然樣品可能因為疏忽從膠塊中跑出
  6.樣品必須在上樣緩沖液中*溶解,不然在凝膠中不能移動。采用同種緩沖液制膠和電泳,點樣必須在緩沖液加到凝膠之上以后。
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